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黄瓜绿斑驳花叶病毒山西西瓜分离物外壳蛋白基因序列分析

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黄瓜绿斑驳花叶病毒山西西瓜分离物外壳蛋白基因序列分析

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黄瓜绿斑驳花叶病毒山西西瓜分离物外壳蛋白基因序列分析

作者:杜江等

来源:《植物保护》2015年第02期

摘要:通过病毒dsRNA分离技术、非序列依赖性PCR扩增(sequenceindependent amplification, SIA)技术和RTPCR等手段对采自山西太谷的西瓜病样进行了检测与鉴定,确定其为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)所侵染。为明确CGMMV西瓜分离物(CGMMVSXTG)的分类地位,本研究进一步克隆了CGMMVSXTG的外壳蛋白基因(coat protein, CP)全序列并进行序列分析,系统进化树分析显示该分离物与

亚洲分离物亲缘关系较近,而与欧洲分离物亲缘关系较远,表明该病毒的不同分离物在分组上可能与地域有一定的关系;接着对不同分离物的CP基因核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比对分析,结果表明该分离物与中国山东分离物(TANG)同源性最高,分别达到99.8%和99.6%。

关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒;序列分析;外壳蛋白基因

中图分类号: S 432.41

文献标识码: A

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是一种正单链RNA 病毒,直杆状,大小为300 nm×18 nm,属烟草花叶病毒属(Tobamovirus)[1]。其危害多种葫芦科作物,是我国农业植物检疫性有害生物[2]。1935年,英国Ainsworth[3]首次报道了黄瓜绿斑驳花叶病毒危害黄瓜。我国自2004年首次从日本进口的南瓜种子中截获CGMMV以来已发生多起进口源性CGMMV[4],2005年,广西农业科学院从广西某农业展示中心观赏南瓜的叶片上分离到了CGMMV[5];2006年,陈红运等[6]从辽宁西瓜上检测到CGMMV;2007年,李红霞等[7]在甘肃南瓜上检测到CGMMV;2008年,秦碧霞等[8]从广西葫芦上检测到CGMMV;2009年,田永蕾等[9]又在北京甜瓜及山东西瓜上检测到CGMMV。

黄瓜绿斑驳花叶病毒严重危害葫芦科植物,不仅影响植物的正常生长,还给农民带来了巨大的经济损失。西瓜果实感染黄瓜绿斑驳花叶病毒后,种子周围的果肉变为紫红色或暗红色水渍状,成熟时变为暗褐色并出现空洞,呈丝瓜瓤状,俗称“血果肉”。严重时,变色部位软化溶解,呈脱落状,味苦不能食用,失去经济价值[10]。山西太谷西瓜闻名三晋,种植面积一度在全国达到最大,有1.73万hm2,成为当地农民增加收入、促进农村发展的重要产业之一。

2013年笔者在山西太谷西瓜地发现疫情,发病率高达90%,病株绿色叶面上具有浅黄、浅绿相间的斑纹,或是叶片皱缩、卷曲。将明显花叶和蕨叶症状的病样采回,应用分子生物学

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